三 、研究内容、创新之处

1、选题的目的、研究内容:

硫化氢作为第三种气体信号分子应用于各领域的多方面研究，并得出可观的研究成果。气体信号分子具有多种病理生理作用。近年来，不少研究人员纷纷开始了气体信号分子在烧伤中，尤其重度烧伤后全身应激反应中作用的研究。并取得具有一定价值的研究结果。目前，气体信号分子尤其是硫化氢在烧伤方面的研究尚且不足，有待做出更多的相关研究。以更多了解硫化氢等在烧伤休克应激反应中的应用价值。

本实验应用大面积烧伤大鼠模型 ，通过对外源性硫化氢干预重度烧伤大鼠对血清中血管活性物质(组胺、p物质)表达的影响和大鼠心率血压的改变，探讨其与烧伤休克后应激反应的关系，为临床严重烧伤后抗休克治疗寻求可能有效的治疗药物提供实验依据，也为对硫化氢的进一步研究提供实验数据。

2、意义及创新之处:

⑴首次研究h2s是否参与了烧伤休克早期应激的病理生理过程。

⑵研究烧伤休克后血清中血管活性物质(组胺、p物质)表达的变化规律。

⑶为严重烧伤早期应激过程引入新的理论机制，为烧伤抗休克治疗寻找新的研究方向。

3、应用前景:

第三种内源性气体信号分子h2s 越来越受到人们的广泛关注和重视,成为当前生物医学领域研究的热门课题。h2s 具有多种生物学效应, 在全身多系统中参与了许多方面的生理及病理生理过程，揭示了某些疾病未知的发病机理，并提出了新的治疗途径，具有广阔的研究前景和应用价值。目前对h2s在心血管循环系统、神经系统及消化系统等的研究已有很大的成果，但在大面积严重烧伤病人脏器保护及与全身炎症反应综合征方面的研究相对缺乏。 本实验旨在探讨h2s对严重烧伤后早期应激反应的抗休克作用，从而为临床重度烧伤患者的疾病演变和治疗提供一条新的思路。

四 、课题设计方案

包括研究工作的主要技术路线、实验方法或资料收集方法、统计处理的方法等:

1.主要技术路线

2.试验方法

1)动物模型制备及分组

78只健康雄性 sd大鼠，体重 200~240 g，购于青海省地方病疾病控制中心。在大鼠适应性喂养1周后，随机分为非烧伤组和烧伤组。烧伤组又分为单纯烧伤组、nahs干预组、ppg干预组。分别设6h、12h、24h、48h组各6只，烧伤组大鼠背部脱毛并乌拉坦麻醉后，仰卧固定在烧伤模型板上，将背部裸露皮肤浸泡在95°c恒温水箱中20秒，制成30%三度烫伤后，立即用纱布拭干水渍，腹腔注射生理盐水40 ml/kg抗休克，自由进食水。nahs干预组补液复苏后腹腔注射硫氢化氢2ml，ppg干预组复苏后腹腔注射ppg2ml。正常对照组大鼠予以背部剃毛及麻醉后浸入 37 cc水浴中假烫 20 s，假烫后不给复苏补液 。单纯烧伤组背部剃毛及麻醉后浸入95 cc水浴中烫 20 s，烫后复苏补液，不给任何干预。

2)大鼠血压、心率的测定。

各组大鼠均在6 h、12 h、24 h、48 h、96 h各时相点内分别随机选取对应大鼠，乌拉坦(100 mg/kg)麻醉下 ，用16道生理测量仪，在颈部颈动脉插管下测定大鼠心率、血压。

3)血标本的采集和处理。

各组大鼠均于取血前 12 h禁食，于6 h、12 h、24 h、48 h、96 h各时相点内分别随机选取对应大鼠，乌拉坦(100 mg/kg)麻醉下 ，剖腹 ，直视下腹主动脉采血 ，每只大 鼠抽血 2 ml，室温 下静置约 20 min后 ，XX转离心 10 分钟，分离出血清 ，置于 一70℃冰箱中冰冻保存，待测。

4)血清硫化氢及各血管活性物质的含量测定

血清中血管活性物质(组胺、p物质)的含量测定采用酶联免疫吸附(elisa)法 ，硫化氢采用比色法测定，操作均按照说明书进行。分别记录每时相点检测血清中各个因子含量 ，比较 各组大 鼠血 清 中硫化氢及c-反应蛋白、il-6、总体抗氧化能力的含量变化。

3.统计学处理方法

采用 spss17.0统计软件进行统计分析。计数资料用例数及百分数表示，计量资料以均数 ±标准差( ±s)表示。率的比较采用卡方检验;不同时相点下各组间均数比较采用方差分析，两组间均数的比较采用 lsd检验;同一时相点两组间比较采用 t 检验 。以 p<0.05表示差异具有统计学意义标准。

五、实施计划进度

文献资料的检索、课题预调查、撰写综述。

药物置备、动物购买、预实验及撰写开题报告。

动物实验研究。

XX. 1--XX.2 实验指标检测及数据整理统计、撰写论文。

XX. 2--XX. 4 完成论文，审查论文。

六、预期研究成果

文章来源：《中国金属通报》 网址: http://www.zgjstbzz.cn/zonghexinwen/2020/0709/374.html